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研究所研究費採択課題詳細 2006年度

贵厂贬β锁遗伝子発现を制御する新规ホメオティック因子群の机能解明

研究课题名 贵厂贬β锁遗伝子発现を制御する新规ホメオティック因子群の机能解明
研究所名 科学技术研究所
研究种别 重点研究
研究概要 (本年度の研究実施计画)
1)遗伝子特异的因子,転写因子の机能の解明
 17年度の研究を引き続き遂行する。17年度に得た遗伝子特异的因子や転写因子について,下垂体株化细胞を利用して,ホルモン遗伝子の転写活性化能を测定する。まず,発现レベルの测定に用いる検索ベクターとして,分泌型アルカリフォスファターゼ遗伝子をレポーターとしてその上流に遗伝子の制御领域断片や制御配列を组み込んだベクターを作成する。次に,特异的结合因子の肠顿狈础を动物细胞系の発现ベクターに组み込む。2种类のベクターを下垂体の株化细胞,あるいは颁翱厂や颁贬翱细胞に导入し,特异的结合因子や転写因子によって発现し细胞外液に分泌されるレポーター遗伝子产物であるアルカリフォスファターゼの活性を测定し,転写活性化能を定量する。
2)新规転写因子のクローニング
 タンパク质间相互作用による解析法を适用し,本研究で得られる因子を用いて,さらに新しい転写因子のクローニングを试みる。
3)転写因子の标的遗伝子の解析
 昨年度作成した転写因子の抗体によるpassive immuizationや,発現ベクターに組み込んで動物細胞内で転写因子を過剰発現させて,細胞や組織がどのように変化するかを調べる。in situ hybridizationを導入して,本課題で得られる因子の系統発生学的な発現過程を解析する。ホルモン遺伝子の個体発生過程における発現パターンと,組織化学などの実験結果と比較対応させて,どの様な因子がホルモン遺伝子の発現に関連しているかを解明する。
4)転写因子の特性评価
 転写因子の结合特性をランダムオリゴマーを用いて评価し,既にクローン化した因子の结合配列との関係を明らかにする。
研究者 所属 氏名
  农学部 教授 加藤幸雄
研究期间 2004.4~2008.3
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