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细菌べん毛フックの自在継ぎ手としての力学原理の解明
| 研究课题名 | 细菌べん毛フックの自在継ぎ手としての力学原理の解明 | ||
| 研究种目等 | 基盘研究 （叠) | ||
| 研究概要 | （研究実施计画） 昨年度は急速冻结したフック繊维を电子顕微镜で観察し，らせんピッチおよび直径の揺らぎを计测することにより弾性係数を算定したので，今年度は水中での「生」の弾性係数を计测する準备を行う。 1．フラジェラ繊维の弾性定数の计测 ポリフック繊维は长さが短く捕捉，计测が难しいので，まず菌体より単离したフラジェラ繊维の弾性定数を计测する。そのために蛍光染色をおこないガラス棒の先端に抗体で固定し，ナノマニュピレータで直接力を加えてピッチの変化を计测する。 2．リコンビナントフック蛋白质の精製 昨年度试験的に精製してフックタンパク质が得られることを确认したので，今年度はクローニングしたフックタンパク质を大量に単离精製し，抗体を作製する。抗体はガラス棒に固定し，フック繊维を固定するのに使う。 3．フック蛋白质の再构成および蛍光染色 フックタンパク质より再构成したできるだけ长いフィラメントの形成をめざす。再构成したポリフックは急速冻结法により固定して，らせん形状が菌体に生えたものと违わないかを电子顕微镜で确认する。フックフィラメントを蛍光顕微镜で観察し，マニュピレータで捕捉するために，フック蛋白质に蛍光色素をラベルする。もしくは贵搁笔を组み込んだフック蛋白质の発现を试みる。 4．レーザトラップ法によるフックフィラメントの捕捉 驰础骋レーザを用いてラテックスビーに固定したフラジェラまたはフックフィラメントの捕捉を试みる。 5．倒立型蛍光顕微镜を使ってのフック繊维の弾性率の测定 1の课题を成功させた后，蛍光顕微镜を用いてレーザトラップやマニュピレータで固定したフックフィラメントの弾性率を计测する。 6．らせんピッチや半径の揺らぎから计算によりフックフィラメントの弾性定数を出せるようにする。また水中でのフックフィラメントの揺らぎのシミュレーションを试みる。 |
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| 研究者 | 所属 | 职 | 氏名 |
| 理工学部 | 教授 | 吉村英恭 | |
| 补助金额（千円） ※直接経费のみ |
2,100 | ||
| 研究期间 | 2005.4～2008.3 | ||
| リンク | |||